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菌种培养前的消毒和灭菌

[导读]消毒和灭菌作为一个独立的节点单独提出是因为它往往决定制种的成败,它贯穿于菌种制作过程的始终,国内一些菌种企 业和厂家往往制种失败,多数原因是制种过程中不能严格按照操作规程操作,消毒和灭菌不彻底,从而不能保质、保量按时生产出菌种。

1 消毒和灭菌的概念

消毒:是指用物理化学方法,杀灭培养料、物体表面及环境中的一部分微生物,只能杀死营养体,不能杀死休眠体和芽孢。

灭菌:是指在一定范围内用物理化学方法,彻底杀灭培养料内外、容器、用具和空气中的所有微生物营养体、休眠体和芽孢。


2 消毒和灭菌的方法

(1)紫外线杀菌:用 30~40W 紫外线管灯照射 20~30 分钟。

(2)甲醛和高锰酸钾混合熏蒸:一般每立方米需 40%甲醛 10毫升、高锰酸钾 7~8 克,进行熏蒸。

(3)使用消毒剂:用 0.1%升汞水浸过的纱布或海绵进行揩擦,或用喷雾器喷雾消毒,喷雾后 20~30 分钟,箱内的杂菌和雾滴一起落到箱底被杀死。

菌种保藏的方法:①斜面低温保存法:将斜面菌种,置于 4℃冰箱保存,以后每隔 2~3 个月转管移接一次。②液体石蜡保存法:注入一层已灭过菌的液体石蜡,使菌种与空气隔绝,降低其新陈代谢的活动,然后在棉塞外包以塑料薄膜,一般可保存一年以上。③木屑试管菌种保存法:用杂木屑按原种的培养基配制装入大号试管,容量为管高的 2/3,擦净管口塞紧棉塞,用牛皮纸包扎管口后高压灭菌,然后移入母种,在 25~28℃下培养,待长满菌丝后,立即移到低温干燥环境保存、或埋于尿素、硝酸铵或地洞中保存,效果更好,并能延长保存时间。④冷冻干燥保藏法:这种方法采用真空、干燥、低温等手段,使菌种新陈代谢活动处于相对静止状态,在低温下快速冷冻,又在低温下真空干燥,而使菌细胞的结构与成分保持原来状态而保存菌种。


此外,还有沙土保存法、液氮超低温保藏法、滤纸片保存法、菌丝球生理盐水保藏法、麦粒保藏法、干孢子真空保藏法等。





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